别担心,丁香实验上线细胞实验锦囊专题,汇集培养、IF 荧光染色、流式细胞术等常见细胞实验经典问题。
冻存前细胞较好,冻存时操作无误及试剂是新鲜的,则在 -80℃ 冰箱冻存的细胞一般半年左右复苏培养时完全没有问题;但若是长期不做,或阶段性实验完成,可将细胞转入液氮冻存,保证下次使用时细胞是可用的。
❹ 传代后次日细胞换液,先用缓冲液漂洗两次以洗去未贴壁的细胞及细胞碎片,再加入新的培养液继续培养;
免疫荧光主要判断目的蛋白的定位,实验过程中会染表征细胞核的 DAPI。拿到免疫荧光结果,使用 PS 等软件进行 merge,如果染色结果只在 DAPI(蓝色)周围有一圈,即细胞膜定位;如果染色结果显示 DAPI 周围到处都有,即胞浆定位;如果染色结果和 DAPI 完全 merge,即细胞核定位。
最后进行面积测定。图像转为 8-bit 后,调整阈值,框选细胞及核,Analyze → Set Measurements,可以 Measure 细胞整体面积或单个面积。
以上就是 丁香实验最新上线的「细胞实验锦囊」专题内容,汇集培养、IF 荧光染色、流式细胞术等常见细胞实验经典问题。
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