肿瘤微环境 (TME) 的组成和空间结构为肿瘤生存和生长、侵袭和转移以及免疫治疗耐药性提供了关键的病理因素。然而,由于当前成像检测技术的局限性,肿瘤组织整体的3D TME尚未得到很好的解析。
近日,由华中科技大学光电与信息学院、华中科技大学附属同济医院血液内科及病理科组成的联合研究团队在《Theranostics》期刊上发表了题为“淋巴瘤肿瘤微环境光片显微系统3D全景式解析”的工作。研究团队深耕医光交叉,基于前沿的光片3D显微镜和透明化组织多重免疫荧光标记,开发了一套高效、数字化、3D 的组织病理检测平台。利用这一新型技术,研究人员首次对完整的淋巴瘤组织内复杂的免疫微环境(TME)进行了原位的全景式可视化和空间构象的定量分析。
研究者首先比较了iDOSCO,uDISCO,CUBIC以及SHIELD四种主流透明化策略,筛选出最适合淋巴瘤组织的uDISCO透明化方法进行淋巴瘤组织透明化;随即开发了一种大视场贝塞尔光片荧光显微镜(B-LSFM),对多重免疫荧光标记的透明化淋巴瘤组织进行高速、高分辨率三维成像;再开发定制的MATLAB程序,根据采集到的多通道3D图像量化细胞亚型的数量和共定位关系。通过这套先进的组织整体透明化-标记-成像-分析流程,研究者对淋巴瘤TME进行了高效的3D可视化和高内涵的细胞分析。
研究者用 CD3、CD8、CD20、CD68、CD163、CD14、CD15、FOXP3 和 Ki67,等多种抗体标记淋巴瘤微环境中的不同细胞类型。对反应性淋巴细胞增生(RLN)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)和血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(AITL)3种淋巴瘤TME的三维成像结果进行定量分析,全面揭示其细胞数量、定位和空间相关性。
综上,研究人员开发了先进的病理组织整体标记和三维成像方法,用于淋巴瘤TME的高效3D可视化和高内涵细胞分析,方法有望替代目前的2D切片病理,成为肿瘤病理诊断和其他临床研究的新工具。论文的通讯作者为华中科技大学光学与电子信息学院教授费鹏,第一作者为华中科技大学同济医院血液内科助理研究员陈丽婷,博士生孟娇,光电学院博士生周瑶、博士后赵方。完成上述工作的华中科技大学医光交叉研究团队具有多年合作经验,长期致力于发展新型的光学显微成像技术及推动新技术在基础医学和临床转化中的应用。
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